Konference: 2006 2. ročník Dny diagnostické, prediktivní a experimentální onkologie
Kategorie: Ostatní
Téma: Postery
Číslo abstraktu: 018p
Autoři: Mgr. Ondřej Zítka; Ing. Dalibor Húska; Ing. Jiří Kukačka; Ing. Soňa Křížková, Ph.D.; MUDr. Zuzana Horáková; doc.RNDr. Vojtěch Adam, Ph.D.; MUDr. Hana Binková, Ph.D.; Prof. MUDr. Richard Průša, CSc.; doc.Ing. Aleš Horna, CSc.; Prof. RNDr. Miroslava Beklová, CSc.; MUDr. Libor Havel; doc.Ing. René Kizek, Ph.D.
Úvod: Glutathion (GSH) byl popsán v
roce 1921 a jeho přítomnost byla dokázána nejen u rostlin či
živočichů, ale dokonce i u bakterií a kvasinek. Byla rozpoznána
jeho významná role při udržování homeostázy těžkých kovů v
organizmu, jeho antioxidační a detoxikační účinky. GSH vděčí za své
redoxní vlastnosti aminokyselině cysteinu, který obsahuje thiolovou
skupinu (-SH). Oxidací GSH vzniká dimer označený jako oxidovaný
glutathion (GSSG). GSSG je pak v glutathionovém cyklu znovu
redukován na GSH. Význam GSH je v ochraně organizmu před vlivem
oxidačního stresu. Navíc může GSH na své -SH skupiny vázat ionty,
včetně iontů těžkých kovů. Tato jeho detoxikační vlastnost může v
terapii nádorových onemocnění znamenat významnou komplikaci.
Materiál a metody: Byly studovány redukovaný a oxidovaný glutathion. GSH vytvářel komplex s cisplatinou ve fosfátovém pufru, pH 7,8. Pro stanovení thiolů a komplexů bylo využito přístroje AUTOLAB analyser ve spojení s VA standem 663 v klasickém tříelektrodovém zapojení. Námi použitou metodou pro stanovení MT byla adsorptivní přenosová technika. Dále bylo využito průtokové injekční analýzy ve spojení s Coulochem III a uhlíkovou pracovní elektrodou.
Výsledky a diskuze: Redukovaný glutathion poskytoval oxidační signály kolem 0,56 V a oxidovaný glutathion kolem 1,16 V. Pro experimenty byly vybrány koncentrace cisplatiny, které jsou běžně terapeuticky využívány. Zjistili jsme, že vytvořený GSPt komplex poskytuje asi o 40–60% nižší proudovou odezvu v porovnání s volným GSH. Průběh hydrodynamických voltamogramů byl také mírně odlišný. Tvorba komplexu byla navíc monitorována spektrofotometricky jako změna absorbance při 280 nm.
Závěr: Námi popsaná elektroanalytická metoda umožňuje velmi snadné a rychlé stanovení komplexu glutathionu s cisplatinou.
Poděkování: Tato studie byla podporována grantem Ligy proti rakovině 2006.
Literatura
Materiál a metody: Byly studovány redukovaný a oxidovaný glutathion. GSH vytvářel komplex s cisplatinou ve fosfátovém pufru, pH 7,8. Pro stanovení thiolů a komplexů bylo využito přístroje AUTOLAB analyser ve spojení s VA standem 663 v klasickém tříelektrodovém zapojení. Námi použitou metodou pro stanovení MT byla adsorptivní přenosová technika. Dále bylo využito průtokové injekční analýzy ve spojení s Coulochem III a uhlíkovou pracovní elektrodou.
Výsledky a diskuze: Redukovaný glutathion poskytoval oxidační signály kolem 0,56 V a oxidovaný glutathion kolem 1,16 V. Pro experimenty byly vybrány koncentrace cisplatiny, které jsou běžně terapeuticky využívány. Zjistili jsme, že vytvořený GSPt komplex poskytuje asi o 40–60% nižší proudovou odezvu v porovnání s volným GSH. Průběh hydrodynamických voltamogramů byl také mírně odlišný. Tvorba komplexu byla navíc monitorována spektrofotometricky jako změna absorbance při 280 nm.
Závěr: Námi popsaná elektroanalytická metoda umožňuje velmi snadné a rychlé stanovení komplexu glutathionu s cisplatinou.
Poděkování: Tato studie byla podporována grantem Ligy proti rakovině 2006.
Literatura
- Hopkins FG, Biochem J, 15 (1921) 286.
- Kizek R, Vacek J, Trnkova L, Jelen F, Bioelectrochemistry, 63
(2004) 19.
- Petrlova J., Potesil D, Zehnalek J, Sures B, Adam V, Trnkova L,
Kizek R, Electrochim. Acta, 51 (2006) 5169
- Kizek R, Vacek J, Trnková L, Klejdus B, Havel L, Chem. Listy, 98 (2004) 160.
Datum přednesení příspěvku: 7. 12. 2006
